Blotting

O blotting ou blotting em biologia molecular e genética é um método laboratorial para transferir proteínas, DNA ou RNA para uma superfície transportadora, geralmente uma membrana de nitrocelulose, PVDF ou nylon. Em muitos casos, isto é feito após a realização da eletroforese em gel, na qual as moléculas são separadas e depois transferidas do gel para a membrana de transferência ou blotting, mas outras vezes as amostras são adicionadas diretamente na membrana (como em dot blot). Após o blotting, as proteínas, ADN ou ARN transferidos são visualizados por coloração com um corante (por exemplo, coloração das proteínas com prata) ou por visualização auto-radiográfica de moléculas marcadas radioactivamente (a marcação é feita antes do blotting) ou por marcação específica de algumas proteínas ou ácidos nucleicos. Este último é feito com anticorpos ou sondas de hibridização que se ligam apenas a algumas moléculas no blot e têm uma enzima ligada a elas. Após a lavagem adequada, esta atividade enzimática (e, portanto, a presença das moléculas que estão a ser estudadas no blot) é visualizada através da incubação com um reagente apropriado, resultando num depósito colorido no blot ou numa reação quimioluminescente, que é registada em película fotográfica.