Defense (englisch für Verteidigung) wird die verteidigende Mannschaft im American Football genannt. Ihre Aufgabe ist es die angreifende Mannschaft daran zu hindern einen First Down oder gar einen Touchdown zu erzielen. Gegebenenfalls kann ein Verteidiger durch einen aufgehobenen Fumble, eine Interception oder einen Safety selbst Punkte erzielen.
Die Defense besteht aus der Defensive Line (DL) und dem sogenannten Backfield. Die Defensive Line bilden in der Regel drei bis sechs Spieler auf den Positionen Defensive Ends (DE) an den äußeren Seiten und Defensive Tackles (DT), beziehungsweise Defensive Guards (DG), dazwischen. Als Backfield werden Safetys, Cornerbacks und die Linebacker zusammengefasst. Die Aufgabe der Cornerbacks und Safetys ist es, die gegnerischen Wide Receiver und Runningbacks daran zu hindern den Ball zu fangen, beziehungsweise weit mit ihm zu laufen. Die Aufgabe der Linebacker ist ähnlich wie die der Defensive Backs, mit Schwerpunkt auf Verteidigung gegen Laufspiel, sie werden jedoch vermehrt auch bei Blitzen eingesetzt. Spielführend in der Defense ist fast immer der mittlere Linebacker (MLB), der für die Defense-Taktik zuständige Trainer wird Defensive Coordinator genannt.